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Les dispositifs de dénombrement microscopique des éléments figurés

 

Les dispositifs de dénombrement étaient auparavant des hématimètres en verre (cellule de Malassez, de Thoma, de Nageotte) qu’il fallait désinfecter après leur utilisation.

Ils ont ensuite été remplacés par des lames en plastique comportant plusieurs puits de comptage comme le système Kova® slide. Ces dernières ont l’avantage d’être prêtes à l’emploi (pas de montage de lamelle) et à usage unique.

TECHNIQUE :

  • Sur des urines entières (non centrifugées)
  • HOMOGÉNÉISER l’échantillon en l’agitant doucement
  • Remplir un hématimètre ou un puits de comptage.
  • Observer au microscope au grossissement X 400
  • Dénombrer les leucocytes et exprimer le résultat en nombre de leucocytes / mL d'urine

 

Le système Kova® slide

Chaque lame comporte 10 puits de comptage.

Kova®slide
© Pascal Fraperie
Kova®slide Kova®slide

    
 

Chaque puits de comptage comprend une grille comportant 9 grands carrés, chacun découpé en 9 petits carrés. Le volume retenu sur la grille est de 1 µL (1 mm3)

Ne compter que les cellules situées à l’intérieur des carrés ; les cellules à cheval sur les traits de la grille ne sont pas prises en compte.

  • Pour les leucocyturies faibles, d'apparence normale, compter le nombre total N de cellules situées sur toute la grille (correspondant à 1 µL ou 1 mm3 d'urine) : N = nombre d’éléments par µL
  • Pour les leucocyturies moyennement élevées, compter le nombre total n de cellules situées dans 9 petits carrés.
    Obtenir le nombre total N de cellules par mm3 (µL) d'urine en multipliant n par 10 :  N = n x 10*
  • Pour les leucocyturies beaucoup plus élevées, compter le nombre n de cellules situées à l'intérieur d'un petit carré.
    Le nombre total N de cellules par mm3 d'urine est obtenu par la formule suivante : N = n x 90*

Kova®slide
Champ au grossissement X400
© Pascal Fraperie

 

*Avec Kova®-Slide on admet que les différents traits de la grille représentent 11 % de la surface. Comme on ne compte que les cellules situées à l'intérieur des carrés, il convient donc de multiplier le résultat par 1,1. Ainsi lorsqu''on compte le nombre n de cellules d'une case : N = n x 9 x 1,1 = n x 10
Lorsqu'on compte le nombre n de cellules situées à l'intérieur d'un petit carré : N =  n x 81 x 1,1 = n x 9O

 

 

La cellule de Malassez

Elle est constituée de 10 bandes verticales de 0.25 mm de large et de 10 bandes horizontales de 0,2 mm de large et présente. On obtient dès lors 100 rectangles. La profondeur entre la lame et la lamelle est de 0,2 mm.

Le volume de la cellule est de 1 mm3 soit 1 µL. Chaque rectangle représente 0,01 mm3.

Le volume sur lequel sont comptés les leucocytes dépend de la leucocyturie : ainsi avec une urine très concentrée, on compte dans un rectangle alors qu'avec des urines peu concentrées, on compte dans la cellule entière.

malassez

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