Gélose TCBS

La gélose TCBS (Thiosulfate Citrate Bile Saccharose) est un milieu d’isolement sélectif utilisé pour la rechercher des Vibrio.

Composition gélose TCBS
Peptone	10,0 g
Extrait de levure	5,0 g
Bile de bœuf	8,0 g
Saccharose	20 g
Bleu de bromothymol	40 mg
Bleu de thymol	40 mg
Citrate de sodium	10,0 g
Thiosulfate de sodium	10,0 g
Citrate ferrique	1,0 g
NaCl	10,0 g
Agar	14,0 g
pH = 8,6
Eau distillée	qsp 1 L

La bile de bœuf inhibe les bactéries à Gram positif et le pH alcalin favorise la culture des Vibrio.

La présence de saccharose et de deux indicateurs de pH (le bleu de bromothymol et le bleu de thymol) permet de connaitre le caractère saccharose des bactéries.

• colonies jaunes : acidification du milieu par fermentation du saccharose = saccharose +
• colonies vertes ou bleues : pas d’acidification du milieu = saccharose –

Le thiosulfate de sodium est une source de souffre à partir de laquelle certaines bactéries forment du sulfure d’hydrogène (H₂S). Ce dernier réagit avec les ions ferriques pour former un précipité noir de sulfure de fer.

• colonies à centre noir : formation de sulfure d’hydrogène =H₂S +
• colonies sans centre noir : pas de formation de sulfure d’hydrogène =H₂S –

Ce milieu est utilisé pour la recherche de Vibrio dans les selles. Vibrio cholerae est saccharose + et forme en 24h à 37°C des colonies jaunes de 2 mm de diamètre.

On l’ensemence directement avec une suspension de selles ou après enrichissement en eau peptonée salée alcaline.

 

Exemples de résultat

Vibrio cholerae sur gélose TCBS 24h à 37°C	Vibrio parahaemolyticus sur gélose TCBS 24h à 37°C