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Gélose TCBS

La gélose TCBS (Thiosulfate Citrate Bile Saccharose) est un milieu d’isolement sélectif utilisé pour la rechercher des Vibrio.

Composition gélose TCBS
Peptone10,0 g
Extrait de levure5,0 g
Bile de bœuf8,0 g
Saccharose 20 g
Bleu de bromothymol40 mg
Bleu de thymol40 mg
Citrate de sodium10,0 g
Thiosulfate de sodium10,0 g
Citrate ferrique1,0 g
NaCl10,0 g
Agar14,0 g
pH = 8,6
Eau distilléeqsp 1 L

La bile de bœuf inhibe les bactéries à Gram positif et le pH alcalin favorise la culture des Vibrio.

La présence de saccharose et de deux indicateurs de pH (le bleu de bromothymol et le bleu de thymol)  permet de connaitre le caractère saccharose des bactéries.

  • colonies jaunes : acidification du milieu par fermentation du saccharose = saccharose +
  • colonies vertes ou bleues : pas d’acidification du milieu = saccharose –

Le thiosulfate de sodium est une source de souffre à partir de laquelle certaines bactéries forment du sulfure d’hydrogène (H2S). Ce dernier réagit avec les ions ferriques pour former un précipité noir de sulfure de fer.

  • colonies à centre noir : formation de sulfure d’hydrogène =H2S +
  • colonies sans centre noir : pas de formation de sulfure d’hydrogène =H2S –

Ce milieu est utilisé pour la recherche de Vibrio dans les selles. Vibrio cholerae est saccharose + et forme en 24h à 37°C des colonies jaunes de 2 mm de diamètre.

On l’ensemence directement avec une suspension de selles ou après enrichissement en eau peptonée salée alcaline.

 

Exemples de résultat

TCBS Vibrio choleraeVibrio cholerae
sur gélose TCBS

24h à 37°C
TCBS Vibrio parahaemolyticusVibrio parahaemolyticus
sur gélose TCBS
24h à 37°C

 

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