Un enfant de 2 ans souffre de diarrhées avec douleurs abdominales et vomissements. Il a de la fièvre.
Son médecin prescrit une coproculture standard.
| Aspect des selles |
Liquides et marron |
| Gram objectif X100 |
Flore polymicrobienne constituée de 70% de Gram – et 30% de Gram + |
| EF objectif x40 |
Leucocytes : très nombreux
Hématies : absence Bacilles présentant une mobilité en vol de moucheron, pas de levures |
| BCP à 37°C | Nombreuses colonies jaunes |
| Hektoen à 37°C | Nombreuses colonies saumon |
| Yersinia CIN à 30°C | Pas de culture |
| Karmali à 37°C sous atmosphère microaérobie | Cette gélose sera observée après 48h d’incubaction |
| Gélose au sang après filtration Millipore™ 0,45 µm à 37°C sous atmosphère microaérobie | Cette gélose sera observée après 48h d’incubation |
| Bouillon Mueller Kauffman à 37°C | Présence d’un trouble |
Questions
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Flore d’apparence normale au Gram.
La présence de très nombreux leucocytes oriente vers une diarrhée inflammatoire.
Les bacilles présentant une mobilité en vol de moucheron à l’état frais oriente vers un Vibrio ou un Campylobacter.
L’âge de l’enfant, l’absence de notion de voyage, la présence de leucocytes oriente vers une infection invasive à Campylobacter.
| Liens utiles |
| Coproculture |
Les colonies saumon sur Hektoen utilisent au moins un des 3 glucides ; ce ne sont pas des Salmonella, ni des Shigella.
Faire un isolement sur milieu chromogène sélectif des Salmonella avec la culture en bouillon Rappaport-Vassiliadis
Remettre à l’étuve les milieu Yersinia CIN et Karmali.
| Milieu chromogène SM2 : présence de colonies bleues
Yersinia CIN : pas de culture Karmali : Nombreuses minuscules colonies + quelques grosses colonies (voir photo ci-dessous)
Milieu Karmali après 48h d’incubation en atmosphère microaérobie
Gélose au sang après filtration Millipore™ 0,45 µm : culture à l’emplacement du disque (voir photo ci-dessous)
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Gélose au sang après filtration Millipore™ 0,45 µm après 48h d’incubation en atmosphère microaérobie
Les colonies bleues sur SM2 sont Estérase – et ß-galactosidase et/ou ß-glucosidase +, ce ne sont pas des Salmonella. Comme il n’y a pas de colonies mauves sur ce milieu, on peut conclure qu’il n’y a pas de Salmonella dans les selles.
Pas de culture sur Yersinia CIN = absence de Yersinia dans les selles.
Les colonies obtenues sur Karmali sont très suspectes d’être des Campylobacter.
Analyser les colonies obtenues sur Karmali : Gram, EF, oxydase et catalase.
| Les examens microscopiques (Cf résultat du Gram ce-dessous) et les tests oxydases et catalase réalisées avec les colonies obtenues sur Karmali et à l’emplacement du filtre millipore permettent de confirmer la présence de Campylobacter.
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Observation au Gram des petites colonies présentes sur la gélose Karmali
Gram : fins bacilles à Gram négatif, incurvés ou en S ou de forme spiralée
EF : bacilles présentant une mobilité en vol de moucheron
Oxydase +
Le test catalase varie chez les Campylobacter selon les espèces.
Le laboratoire ne disposant pas de galerie API Campy, la galerie suivante est ensemencée :
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La souche isolée appartient à l’espèce Campylobacter jejuni ssp jejuni.
| Document utile |
| Identification des Campylobacter |
Campylobacter est un microorganisme microaérophile, il ne cultive pas en aérobiose.
L’enfant de 2 ans est atteint d’une diarrhée inflammatoire à Campylobacter jejuni ssp jejuni.
Campylobacter est difficile à repérer à la coloration de Gram au sein d’une flore commensale souvent abondante car il est très fin et souvent pâle au Gram.
| FIN DE L’ÉTUDE DE CAS |