L’aspiration endotrachéale est modérément contaminée par la salive (seulement 15 cellules épithéliales pharyngées/champ).

Le nombre de granulocytes par champ est supérieur à 25 ce qui indique que le prélèvement provient probablement du foyer infectieux.

Selon la classification de Murray et Washington, c’est une aspiration endotrachéale de classe 4 donc de qualité acceptable. Elle peut être mise en culture.

La culture sur la gélose Drigalski indique que le crachat contient des bacilles à Gram négatif non exigeants. Les bacilles à Gram négatif sont généralement sensibles à l’association ANC (Acide nalidixique + colistine), c’est pourquoi ils n’ont pas cultivé sur la GS + ANC. Par contre ils cultivent très bien sur la gélose chocolat enrichie. En effet cette gélose est à la fois riche et non sélective. On n’observe sur les géloses Drigalski et chocolat enrichie le même type de colonie, c’est donc très probablement le même bacille qui a cultivé sur ces deux géloses. La différence de taille des colonies sur ces deux milieux peut s’expliquer par le fait que la gélose chocolat est plus riche que la gélose Drigalski.

La culture sur la GS + ANC indique que ce crachat contient très probablement deux types de bactéries à Gram positif. La culture des bactéries à Gram positif est inhibée sur la gélose Drigalski. Sans surprise, ils semblent que ces bactéries à Gram positif ont également cultivé sur la gélose chocolat enrichie.

La concentration dans le crachat du bacille à Gram négatif est voisine de 2,7. 10⁵ UFC/mL.

Pour ce calcul, on utilise la formule suivante : C = (n/V) x (1/dilution)
Ainsi pour n = 1 (une colonie) ; V = 100 µL soit 10^-1 mL et dilution = 10^-2
on trouve C = (270/10^-1) x (1/10^-2) = 2,7. 10⁵ UFC/mL.

La concentration dans le crachat du germe alpha hémolytique sur la gélose au sang + ANC est de 1,4. 10⁴ UFC/mL et celui formant des colonies opaques  a une concentration de 5. 10³ UFC/mL

Le seuil au delà duquel on considère que le microorganisme est responsable d’une infection est de 10⁵ UFC/mL dans le cas d’aspiration endotrachéale. Ce seuil est franchi seulement pour le bacille.

• Réaliser un test oxydase.

C’est un bacille à Gram négatif, non exigeant, oxydase +, isolée des sécrétions bronchopulmonaires d’un sujet sous ventilation assistée : ORIENTATION vers Pseudomonas, Burkholderia et genres apparentés.

• Ensemencement d’une galerie API 20 NE, d’une gélose VF et d’un contrôle de pureté sur gélose TCS
• Antibiogramme sur gélose Mueller Hinton en déposant les disques préconisés par le CA-SFM EUCAST.

Le contrôle de pureté est valide car on observe un seul type de colonie sur la gélose TCS.

Le type respiratoire aérobie stricte confirme l’orientation vers Pseudomonas, Burkholderia et genres apparentés.

La galerie API NE présente un profil caractéristique de Pseudomonas aeruginosa.

On note un antagonisme entre ces deux antibiotiques, en effet l’imipenem est un fort inducteur de la synthèse de la céphalosporinase naturelle. La quantité de la céphalosporinase est donc plus élevée entre les deux disques et, en conséquence, la ceftazidime est à cette endroit davantage hydrolysée et ne peut diffuser aussi loin du disque. Ainsi entre ces deux disques, une culture se développe à proximité du disque de ceftazidime.

Cet antagonisme rend difficile la mesure du diamètre d’inhibition autour de la ceftazidime : il faut mesurer un rayon d’inhibition en partant du centre du disque jusqu’au bord de la zone d’inhibition dans la direction opposée au disque d’imipenem puis le multiplier par 2.

Étant donné que les disques d’antibiotiques ont un diamètre de 6 mm, on pouvait estimer la longueur de ce rayon à 14 mm. Le diamètre d’inhibition est donc de 28 mm. Ce diamètre est supérieur à 17 mm, la souche est donc sensible.

La céphalosporinase est en fait produite en trop petite quantité pour que la bactérie résiste à ces deux antibiotiques. C’est un phénotype céphalosporinase bas niveau.