Quiz jaune Hémocultures 0% Vous disposez de 10 minutes pour répondre à ce quiz. Les 10 minutes se sont écoulées ! Quiz jaune hémocultures Évaluation des connaissances sur les hémocultures. Pour chaque question, cochez la ou les propositions exactes. Attention ! Si vous cochez une réponse fausse, vous perdrez des points ! The number of attempts remaining is 10 1 / 13 La recherche de bactéries dans le sang nécessite d'observer un état frais réalisé avec une goutte de sang d'ensemencer des géloses riches en déposant une goutte de sang d'ensemencer un bouillon avec 5 à 10 mL de sang d'observer un frottis sanguin coloré au Gram Explication : Lors de bactériémie pathologique, la concentration en bactéries du sang est tellement faible qu'il est impossible de les observer dans le sang, ni de les obtenir en culture en déposant seulement une goutte de sang. Il faut donc mettre en culture un volume de sang élevé ; tellement élevé qu'il ne peut être déposé à la surface d'une boite. Ce volume varie de 5 à 10 mL selon le volume de bouillon dans les flacons. 2 / 13 On considère que les bactéries présentes dans le sang sont pathogènes au-delà d'un seuil de 104 UFC/mL 105 UFC/mL pas de seuil de pathogénicité 103 UFC/mL 3 / 13 Lors d'une hémoculture, on ensemence généralement deux flacons car un flacon permet la culture en aérobiose et l'autre en anaérobiose un flacon permet la culture des bactéries à Gram + et l'autres celui des bactéries à Gram - un flacon sera incubé à 30°C et l'autre à 37°C cela permet de doubler la quantité de sang mis en culture Explication : Pour permettre la croissance des bactéries quel que soit leur type respiratoire, il convient de prévoir un flacon pour une culture en aérobiose et un autre pour une culture en anaérobiose. Beaucoup d'espèces sont capables de cultiver aussi bien en aérobiose qu'en anaérobiose. Comme la concentration en bactéries dans le sang reste toujours très faible, ensemencer 2 flacons permet de doubler le volume de sang testé et donc on augmente la sensibilité des hémocultures pour ces espèces là. 4 / 13 Après introduction du sang dans les flacons d'hémoculture, si on ne peut les placer aussitôt dans l'automate, il faut les laisser à température ambiante au maximum 2h les laisser à température ambiante au maximum 12h les placer dans une étuve à 37°C jusqu'au leur dépôt dans l'automate les placer dans un réfrigérateur au maximum 2h Explication : L'automate mesure la teneur en CO2 initiale dans le flacon (juste après qu'il ait été introduit dans l'automate) puis la mesure régulièrement ensuite et calcule chaque fois la différence entre la teneur en CO2 à l'instant t et la teneur initiale. Lorsque cette différence dépasse un seuil alors l'automate déclare ce flacon positif. Pour augmenter la rapidité avec laquelle un automate détecte les flacons positifs, il faut tout faire pour empêcher la croissance bactérienne avant l'introduction du flacon dans l'automate. Comme certaines bactéries sont fragiles, on ne peut les placer au réfrigérateur. La seule solution est de faire en sorte que les flacons soient introduits dans l'automate le plus rapidement possible après le prélèvement. 5 / 13 Chez un sujet présentant une bactériémie, si le volume de sang introduit dans le flacon est en dessous du volume préconisé on prend le risque que l'automate ne détecte pas les bactéries ce n'est pas un problème car le milieu de culture dans le flacon est assez riche pour la culture des bactéries on risque augmenter le délai de détection de la bactérie par l'automate Explication : La concentration en bactéries dans le sang est toujours faible. Si le volume introduit est plus faible que le volume préconisé, on diminue la sensibilité des hémocultures et donc on augmente le risque d'avoir des hémocultures faussement négatives. Cela joue également sur la rapidité avec laquelle les flacons sont détectés positifs. 6 / 13 Si on introduit un volume de sang dans le flacon d'hémoculture supérieur au volume préconisé ce n'est pas possible. Le vide présent dans les flacons avant ensemmencement exclut la possibilité de flacons trop remplis. ce n'est pas un problème. Au contraire, plus il y a de sang moins il y a d'hémocultures faussement négatives. c'est un problème. Cela peut provoquer des hémocultures faussement positives. c'est un problème. On risque de faux négatifs car s'il y a trop de bactéries, elles n'auront pas assez d'éléments nutritifs pour se développer. Explication : Effectivement cela peut provoquer des hémocultures faussement positives à cause de la production de CO2 par les hématies. Il faut donc surveiller le volume de sang prélevé et on ne peut compter sur la pression négative des flacons pour maitriser le volume prélevé. 7 / 13 Une hémoculture peut être faussement négative si les régles d'asepsie au moment du prélèvement n'ont pas été respectées le volume de sang introduit dans le flacon d'hémoculture est trop faible le volume de sang introduit dans le flacon d'hémoculture est trop élevé 8 / 13 Si à un instant t, l'automate signale positif seulement le flacon aérobie, on peut en conclure que on ne peut rien conclure sur son type respiratoire la bactérie qui s'est développée est aéro-anaérobie la bactérie qui s'est développée est aérobie stricte la bactérie qui s'est développée est anaérobie stricte Explication : Il est rare que les deux flacons soient détectés positifs simultanément. On ne peut rien conclure. 9 / 13 Le milieu contenu dans le flacon anaérobie contient des inhibiteurs des bactéries aérobies contient des substances réductrices qui neutralisent le dioxygène 10 / 13 Les milieux de culture placés dans les flacons d'hémoculture contiennent du rouge de phénol pour détecter la croissance bactérienne sont des milieux pauvres car le sang introduit apporte les facteurs de croissance nécessaires aux bactéries exigeantes contiennent des anticoagulants sont des milieux riches afin de permettre la croissance des bactéries exigeantes 11 / 13 Antibiogramme en urgence lors de diagnostic de bactériémie Il n'est pas nécessaire de le faire en urgence car il existe un traitement antibiotique probabiliste efficace pour toutes les bactériémies On peut utiliser la fine culture obtenue après 6 h d'incubation des géloses ensemencée avec le bouillon d'hémoculture Il n'est pas possible de réaliser un antibiogramme par la méthode des disques avec le bouillon d'hémoculture car cette méthode est une méthode standardisée et il faut donc obligatoirement faire l'antibiogramme avec des colonies isolées obtenues après une incubation d'au moins 18h. On peut réaliser un antibiogramme par la méthode des disques en ensemmençant la gélose MH/MHF avec une dilution du bouillon d'hémoculture Les résultats de l'antibiogramme ne seront validés qu'après s'être assuré du caractère monomicrobien du bouillon d'hémoculture Explication : L'urgence de trouver un traitement antibiotique efficace oblige de faire cette antibiogramme sans attendre d'avoir une culture de 18h sur gélose et donc sans respecter le protocole de cette méthode standardisée. Effectivement, on utilise la fine culture obtenue sur gélose après 6 heures d'incubation ou une dilution du bouillon d'hémoculture. Il s'agira ensuite de vérifier le caractère monomicrobien du bouillon d'hémoculture et s'assurer que la densité de la culture obtenue sur la gélose MH/MHF est correcte. 12 / 13 Le caractère monomicrobien d'une bactériémie peut être estimé en observant un frottis sanguin coloré par la méthode de Gram en faisant un Gram de la culture dans le flacon en réalisant un état frais sur une goutte de sang en observant les géloses non sélectives ensemencées avec le bouillon d'hémoculture 13 / 13 À propos de l'interprétation des hémocultures Si l'espèce isolée est un Staphylococcus epidermidis, on peut conclure à une contamination cutanée au moment du prélèvement Il est intéressant de confronter les résultats obtenus avec les 3 paires de flacons d'hémoculture ensemencés. Elle est très simple car le sang est normalement stérile. Donc il y a bactériémie chaque fois qu'un flacon est positif Si l'espèce isolée est Streptococcus pneumoniae, il est certain que c'est une bactériémie 0% Relancer le quiz Quitter